Terapia Epigenómica en Colecistits

Tema: Importancia de la inestabilidad de microsatélites y la metilación de genes como pronóstico de biomarcadores durante la progresión del cáncer de vesícula biliar y la colecistitis
Mecanismo epigenómico tratado: Metilación de ADN  


Cómo se lo hizo   
Mediante el tratamiento con decitabina (5-Aza-2′-deoxycytidine), un inhibidor de ADN metiltransferasa (DNMTi)

Resultados 
El tratamiento por administración de decitabina (5-Aza-2′-deoxycytidine) produjo una reducción de la inflamación en los modelos animales con Colecistitis y un efecto antitumoral en los modelos con cancer de vesícula biliar.

Referencia Bibliográfica 
Chen J. El ARN largo MALAT1 no codificante potencia el crecimiento e inhibe la senescencia al antagonizar ABI3BP en las células cancerosas de la vesícula biliar. [Internet]. 2019 [Citado 11 Enero 2020]. Disponible en: https://www.researchgate.net/profile/Tannishtha_Saha/publication/276208102_Significance_of_Microsatellite_Instability_and_Gene_Methylation_as_Prognostic_Biomarkers_during_Gallbladder_Cancer_Progression-A_Review/links/555a4f9b08aeaaff3bfabd59.pdf

Técnicas de Edición de Acidos Nucléicos en Colecistitis

Tema: Receptor activado por el proliferador de peroxisoma, previene la formación de cálculos biliares en los ratones C57bl mediante la regulación de la síntesis de ácidos biliares y la circulación enterohepática

Tipo de Edición: Somática in vivo

Dirigida hacia: ARNip (ARNm)

Dirigido por: Transfección con lentivirus y en células Caco2 mediante tratamiento con agonista de PPAR γ

Órgano a tratar: Vesícula biliar

Vía de administración: Vía intravenosa

Resultados corto plazo: Mejoró el contenido de ácidos biliares pero no hubo cambios en los grupos contenido de fosfolípidos

Mediano plazo: El PPARγ activado indujo la expresión de genes implicados en la circulación enterohepática y la síntesis de ácidos biliares

Largo plazo: Se mostró  la activación farmacológica de PPARγ por pioglitazona previene la formación de cálculos biliares de colesterol

Referencia Bibliográfica

Yeuming S. Receptor activado por el proliferador de peroxisomas  Previene la formación de cálculos biliares de colesterol en ratones C57bl mediante la regulación de la síntesis de ácidos biliares y la circulación enterohepática. [Internet]. 2018 [Citado 04 Enero 2020]. Disponible en: https://www.hindawi.com/journals/bmri/2018/7475626/

Terapia con Stem Cells en Colecistitis

Tema: Generación de células funcionales tipo colangiocito a partir de células madre pluripotentes humanas y células HepaRG

Tipo de Stem Cells: Células madre pluripotentes y celulas HepaRG

Método de Obtención:Se recogieron los hepatoblastos de hESC / hiPSC con tampón de disociación celular  y se sembraron en placas recubiertas con colágeno con medio de recubrimiento durante 4 horas. Las células fueron incubadas durante la noche con medio de diferenciación biliar. 

Vía de administración:Algunos métodos para administración de  células madre pluripontentes requieren integración viral y más modificaciones genéticas para su uso potencial como terapia celular. Ej. Autólogo y alogénico. 

Resultado corto plazo: Diferenciar las células madre pluripotentes en células similares a colangiocitos, que muestran similitudes estructurales y funcionales con las células de las vías biliares en el hígado normal, estas células maduras reemplazan el tejido dañado por la enfermedad o la lesión

Mediano plazo:  La capacidad de diferenciación de estas células permite la generación de una cantidad ilimitada de células similares a los hepatocitos para trasplante e investigación.

Largo plazo: Estas células serán útiles para la in vitroestudio de los mecanismos moleculares del desarrollo del conducto biliar y tienen importancia en estrategias terapéuticas y bioingeniería hepática.

Referencia Bibliográfica 

Combettes D. Generación de células funcionales tipo colangiocito a partir de células madre pluripotentes humanas y células HepaRG. [Internet]. 2015 [Citado 28 Diciembre 2019] Disponible en: https://aasldpubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/hep.27165

Ejemplo de Transgénicos en Colecistitis- Ventajas y Desventajas de los Transgénicos

Tema: La activación crónica de FXR en ratones transgénicos causó toxicidad perinatal y ratones sensibilizados a la toxicidad del colesterol

Informes anteriores han sugerido funciones beneficiosas de FXR (receptor nuclear farnesoide X ) en la homeostasis de los ácidos biliares, lípidos y glucosa. Para investigar el efecto de la activación crónica de FXR in vivo, generamos ratones transgénicos que expresan de forma condicional y de tejido la forma activada de FXR en el hígado y el intestino. Los ratones transgénicos mostraron varios fenotipos intrigantes, incluida la letalidad neonatal parcial, el retraso del crecimiento y la toxicidad hepática espontánea. 

Referencia bibliográfica 

Cheng Q. La activación crónica de FXR en ratones transgénicos causó toxicidad perinatal y los ratones sensibilizados a la toxicidad del colesterol. [Internet]. 2015 [Citado 17 Diciembre 2019]. Disponible en: https://academic.oup.com/mend/article/29/4/571/2556211

ADN Recombinante Artifical en Colecistitis

Recientemente, las piedras de la vesícula biliar han sido contenidas en sales biliares saturadas con un 70% de colesterol proximal. Esto llevó a investigar cómo se puede usar el transformador Streptococcus salivarius con el plásmido pMG36bsh para fragmentar el colesterol de cálculos biliares in vitro. El ARNm total de S. salivarius se produjo usando easy-spinTM, kit de extracción de ARN total y PCR cDNA-RT para observar el cambio después del porcentaje de vector pMG36bsh y preparar S. salivarius tiene dos copias de BSH genes (CGH, BSH) para fragmentar cálculos biliares.

Referencia Bibliográfica

Arismendi G. Estudio histopatológico de la presencia de bacterias tipo Helicobacter pylori en especímenes quirúrgicos con colecistitis crónica. [Interne]. 2015 [Citado 14 Diciembre 2019]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0210570511002299

Recombinacion de ácidos nucleicos en la naturaleza

El ADN recombinante es el conjunto de técnicas que permiten aislar un gen de un organismo, para su posterior manipulación e inserción en otro diferente, de esta manera podemos hacer que un organismo animal, vegetal, bacteria, hongo o un virus produzca una proteína que le sea totalmente extraña. En la naturaleza existen varios ejemplos donde se evidencia adn recombinante como bacteriófagos, plásmidos, cósmidos. La conjugación es un proceso de transferencia genética que requiere contacto directo entre una bacteria y otra. 

Referencia bibliográfica 

Murray F. Fragmentation of gallbladder stones using transformer streptococcus salivarius and measuring of RNA expression to cholesterol lowering genes.[Internet]. 2018 [Citado 8 Diciembre 2019]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/328319757_Fragmentation_of_gallbladder_stones_using_transformer_streptococcus_salivarius_and_measuring_of_RNA_expression_to_cholesterol_lowering_genes

Técnica Molecular de Epigenomica en Colecistitis

El análisis basado en microarrays inicialmente proporcionó datos que sugerían que la expresión de MALAT1 estaba regulada al alza, mientras que la de la proteína de unión al miembro 3 de la familia ABI (ABI3BP) estaba regulada a la baja en tejidos y líneas celulares de cáncer de vesícula biliar (GBC). Los resultados confirmaron que los efectos desencadenados por ABSe observó que MALAT1 regulaba negativamente la expresión de ABI3BP a través del reclutamiento del potenciador de homólogo 2 de zeste (EZH2) en la región promotora de ABI3BP.

Referencia Bibliográfica 

Grison S. Características clínicas y perfiles genéticos de pacientes jóvenes y adultos con enfermedad hepática colestásica. [Internet]. 2019 [Citado 01 Diciembre 2019]. Disponible en: https://www.reed.es/ArticuloFicha.aspx?id=3953&hst=0&idR=77&tp=1