Terapia con Stem Cells en Colecistitis

Tema: Generación de células funcionales tipo colangiocito a partir de células madre pluripotentes humanas y células HepaRG

Tipo de Stem Cells: Células madre pluripotentes y celulas HepaRG

Método de Obtención:Se recogieron los hepatoblastos de hESC / hiPSC con tampón de disociación celular  y se sembraron en placas recubiertas con colágeno con medio de recubrimiento durante 4 horas. Las células fueron incubadas durante la noche con medio de diferenciación biliar. 

Vía de administración:Algunos métodos para administración de  células madre pluripontentes requieren integración viral y más modificaciones genéticas para su uso potencial como terapia celular. Ej. Autólogo y alogénico. 

Resultado corto plazo: Diferenciar las células madre pluripotentes en células similares a colangiocitos, que muestran similitudes estructurales y funcionales con las células de las vías biliares en el hígado normal, estas células maduras reemplazan el tejido dañado por la enfermedad o la lesión

Mediano plazo:  La capacidad de diferenciación de estas células permite la generación de una cantidad ilimitada de células similares a los hepatocitos para trasplante e investigación.

Largo plazo: Estas células serán útiles para la in vitroestudio de los mecanismos moleculares del desarrollo del conducto biliar y tienen importancia en estrategias terapéuticas y bioingeniería hepática.

Referencia Bibliográfica 

Combettes D. Generación de células funcionales tipo colangiocito a partir de células madre pluripotentes humanas y células HepaRG. [Internet]. 2015 [Citado 28 Diciembre 2019] Disponible en: https://aasldpubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/hep.27165

Ejemplo de Transgénicos en Colecistitis- Ventajas y Desventajas de los Transgénicos

Tema: La activación crónica de FXR en ratones transgénicos causó toxicidad perinatal y ratones sensibilizados a la toxicidad del colesterol

Informes anteriores han sugerido funciones beneficiosas de FXR (receptor nuclear farnesoide X ) en la homeostasis de los ácidos biliares, lípidos y glucosa. Para investigar el efecto de la activación crónica de FXR in vivo, generamos ratones transgénicos que expresan de forma condicional y de tejido la forma activada de FXR en el hígado y el intestino. Los ratones transgénicos mostraron varios fenotipos intrigantes, incluida la letalidad neonatal parcial, el retraso del crecimiento y la toxicidad hepática espontánea. 

Referencia bibliográfica 

Cheng Q. La activación crónica de FXR en ratones transgénicos causó toxicidad perinatal y los ratones sensibilizados a la toxicidad del colesterol. [Internet]. 2015 [Citado 17 Diciembre 2019]. Disponible en: https://academic.oup.com/mend/article/29/4/571/2556211

ADN Recombinante Artifical en Colecistitis

Recientemente, las piedras de la vesícula biliar han sido contenidas en sales biliares saturadas con un 70% de colesterol proximal. Esto llevó a investigar cómo se puede usar el transformador Streptococcus salivarius con el plásmido pMG36bsh para fragmentar el colesterol de cálculos biliares in vitro. El ARNm total de S. salivarius se produjo usando easy-spinTM, kit de extracción de ARN total y PCR cDNA-RT para observar el cambio después del porcentaje de vector pMG36bsh y preparar S. salivarius tiene dos copias de BSH genes (CGH, BSH) para fragmentar cálculos biliares.

Referencia Bibliográfica

Arismendi G. Estudio histopatológico de la presencia de bacterias tipo Helicobacter pylori en especímenes quirúrgicos con colecistitis crónica. [Interne]. 2015 [Citado 14 Diciembre 2019]. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0210570511002299

Recombinacion de ácidos nucleicos en la naturaleza

El ADN recombinante es el conjunto de técnicas que permiten aislar un gen de un organismo, para su posterior manipulación e inserción en otro diferente, de esta manera podemos hacer que un organismo animal, vegetal, bacteria, hongo o un virus produzca una proteína que le sea totalmente extraña. En la naturaleza existen varios ejemplos donde se evidencia adn recombinante como bacteriófagos, plásmidos, cósmidos. La conjugación es un proceso de transferencia genética que requiere contacto directo entre una bacteria y otra. 

Referencia bibliográfica 

Murray F. Fragmentation of gallbladder stones using transformer streptococcus salivarius and measuring of RNA expression to cholesterol lowering genes.[Internet]. 2018 [Citado 8 Diciembre 2019]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/328319757_Fragmentation_of_gallbladder_stones_using_transformer_streptococcus_salivarius_and_measuring_of_RNA_expression_to_cholesterol_lowering_genes

Técnica Molecular de Epigenomica en Colecistitis

El análisis basado en microarrays inicialmente proporcionó datos que sugerían que la expresión de MALAT1 estaba regulada al alza, mientras que la de la proteína de unión al miembro 3 de la familia ABI (ABI3BP) estaba regulada a la baja en tejidos y líneas celulares de cáncer de vesícula biliar (GBC). Los resultados confirmaron que los efectos desencadenados por ABSe observó que MALAT1 regulaba negativamente la expresión de ABI3BP a través del reclutamiento del potenciador de homólogo 2 de zeste (EZH2) en la región promotora de ABI3BP.

Referencia Bibliográfica 

Grison S. Características clínicas y perfiles genéticos de pacientes jóvenes y adultos con enfermedad hepática colestásica. [Internet]. 2019 [Citado 01 Diciembre 2019]. Disponible en: https://www.reed.es/ArticuloFicha.aspx?id=3953&hst=0&idR=77&tp=1

Microarray en Colecistitis

La expresión de carboxipeptidasa hepática E (ECP) disminuye en pacientes con cálculos biliares en el colesterol. Este estudio ayuda en la indetificar laa funcion de ECP en los cálculos biliares. La expresión de CPE hepática se detectó mediante una reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR), Western blot. El microarray de cDNA identificó el CPE como un gen regulado a la baja en el grupo CGS. La expresión descendente del CPE del hígado puede reducir la secreción de CCK en suero y contribuir a la formación de cálculos biliares en el colesterol.

Referencia Bibliográfica

Zhou J. La expresión de la carboxipeptidasa E hepática disminuye en pacientes con cálculos biliares de colesterol. [Internet]. 2015[Consultado 24 Noviembre 2019]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4542421/

Reacción en Cadena de la Polimerasa en Colcistitis

Tema: ¿Existe una correlación entre Helicobacter Pylori y especies enterohepáticas de Helicobacter y colecistitis por cálculos biliares?
Objetivos: Evaluar la asociación entre la presencia de Helicobacter spp. y colecistitis biliar para poder diagnosticar de una correcta manera

Tipo de Muestra Biológica: Cálculos Biliares, Bilis, mucosa de vesícula biliar, muestras de suero y cepas de control.

Tipo de Ácido Nucleico: ADN Genómico Bacteriano.

Extracción ADN: Se utilizó el método modificado de Swidsinki

Gen a amplificar: H. pylori Hsp60              

                               H. hepaticus 16S rRNA  

                               H. bilis 16S rRNA,          

                               H. pullorum 16S rRNA   

                            (Recomiendo poner el peso en pares de bases)

Tipo de PCR: PCR múltiple

	T°	Tiempo
Desnaturalización	56°	30s
Hibridación	72°	30s
Elongación	72°	60s

30 ciclos

  

Visualización: (Recomiendo poner los valores para tener un resultado analítico)

Referencia Bibliográfica

Doosti A. ¿Existe una correlación entre Helicobacter Pylori y especies de Helicobacter enterohepáticas y colecistitis por cálculos biliares?. [Internet]. 2017 [Consultado 17 Noviembre 2019]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5903923/                                                                         

Prueba de Tamizaje y Confirmatoria de la Colecistitis

El tamizaje de la colelitiasis se da por un diagnóstico clínico y el examen físico habiendo un hallazgo en la ecografía. También análisis del laboratorio hacia las enzimas hepáticas como lipasas y amilasas sericas. Además un hemograma y pruebas de orina pueden servir como pruebas de tamizaje. La ecotomografía es muy sensible y espécífica para diagnosticar cálculos vesiculares. Este examen tiene una alta sensibilidad (95%) y especificidad (94%). Ésta, por su contenido líquido y su cercanía a la pared abdominal, es fácilmente explorable por ultrasonido. 

Referencia Bibliográfica

Ocares M. Acceso a colecistectomía en un programa de tamizaje ecográfico de colelitiasis en centros de medicina familiar. [Inernet]. 2016 [Citado 9 Noviembre 2019]. Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-98872016000300006

Cortez V. Diagnostico y tratamiento de la colecistitis y colelitiasis. [Internet]. 2014 [Citado 9 Noviembre 2019]. Disponible en: http://www.cenetec.salud.gob.mx/descargas/gpc/CatalogoMaestro/237_IMSS_09_Colecistitis_Colelitiasis/EyR_IMSS_237_09.pdf

Alteraciones de la Epigenómica en Colecistitis

La exposición a agentes "tóxicos" que se producen en el útero antes del nacimiento y la exposición ambiental a varios agentes químicos como los metales pesados son capaces de inducir cambios epigenéticos como: La interacción de las histonas acetiltransferasas (HAT) y las histonas desacetilasas (HDAC) afectan en gran medida la transcripción de genes y, en particular, se ha sugerido que las HDAC son importantes en homeostasis lipídica. Es de destacar que los microRNAs (miR-122, miR-370 y miR-33) tienen una gran influencia en la homeostasis del colesterol.

Referencia Bibliográfica

Gozales C. Cetoacidosis asociada a colecistitis aguda. [Internet]. 2014 [Citado 3 Noviembre 2019]. Disponible en: http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1699-695X2014000200011

Bonfrate L. Opiniones actuales sobre genética y epigenética de la enfermedad de cálculos biliares de colesterol. [Internet]. 2014 [Citado 3 Noviembre 2019]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3649201/

Alteraciones de la Traducción en Colecistitis

Las enfermedades de la vesícula biliar se asociaron con la sobreexpresión de MUC3 y MUC5B. Estos eventos se relacionan con la formación de cálculos biliares. Se debe explorar la relación entre las citoquinas y la inflamación relacionada con la expresión de MUC y el mecanismo que lo controla. Expresión del gen MUC en tejidos de la vesícula biliar. Tanto el ARNm de MUC3 como el de MUC5B estaban regulados al alza en los grupos de colecistitis con cálculos de colesterol (S) y colesterol (P) en comparación con el grupo control (C) (p <0,05). 

Referencia Bibliográfica

Lak H. Expresión de MUC en tejidos epiteliales de la vesícula biliar en la enfermedad de la vesícula biliar asociada al colesterol. [Internet]. 2016 [Citado 19 Octubre 2019]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5003211/

Alteraciones de las Transcripción en Colecistitis

El consumo de ácidos grasos polinsatrudrados (AGPI) son reguladores negativos de la lipogenesis hepatica, esto se debe a que los AGPI tienen una regulación negativa hacia las enzimas lipogenicas, por la inhibición de la transcripción y por una menor estabilidad de ARNm de las proteínas que se unen a los factores de transcripción de los esteroles (SREBPs). Estas proteínas son factores transcripcionales que regulan la lipogenesis y la síntesis de colesterol en el higado y tejido adiposo. Esto permite que la colecistitis no se desarrolle tanto al consumir los AGPI. 

Referencia Bibliográfica

Trostchansky I. Colecistitis. [Internet]. 2018 [Citado 19 Octubre 2019]. Disponible en: https://www.quirurgicab.hc.edu.uy/images/Colecistitis_aguda_CQFM.pdf

Vilst V. Litiasis biliar en el niño, diez años de experiencia. [Internet]. 2015 [Citado 19 Octubre 2019]. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-75312015000100004&lng=es.

Alteracion de la Genómica en Colecistitis

Se han detectado varios polimorfismos genéticos asociados a ésta patología, tal es el caso de los polimorfismos de apo E4 y apo B (XbaI), que favorecen un aumento en la captación de LDL y por lo tanto en la concentración hepática y biliar de colesterol con una subsecuente formación de cálculos. Otros genes relacionados son: la apolipoproteína A-I, la proteína de trasferencia de ésteres de colesterol (CETP), miembros de la familia de receptores de las LDL, las enzimas lipoproteín lipasa (LPL) y la colesterol 7-alfa hidroxilasa (CYP7), entre otras.

Referencia bibliográfica

Siddiqui A. Colecistitis. [Internet]. 2016 [Citado 11 Octubre 2019]. Disponible en: https://www.msdmanuals.com/es-ec/professional/trastornos-hep%C3%A1ticos-y-biliares/trastornos-de-la-ves%C3%ADcula-biliar-y-los-conductos-biliares/colelitiasis

Montes J, Galindo F. Colecistitis Aguda. [ Internet]. 2015 [Citado 11 Octubre 2019]. Disponible en: http://www.sacd.org.ar/ccuarentayuno.pdf

Colecistitis

La colecistitis se produce por cálculos biliares que obstruyen el tubo que sale de la vesícula. Esto se da como consecuencia de una acumulación de bilis (líquido digestivo que se libera al intestino delgado) que puede causar inflamación.

Esta inflamación generalmente causa dolor agudo en la porción media o superior derecha del abdomen. El dolor también se puede irradiar entre las escápulas. En los casos graves, la vesícula biliar se puede rajar o reventar y liberar bilis adentro del abdomen, causando dolor severo.

Referencia bibliográfica

RadiologyInfo. Colecistitis. [Internet]. 2019 [Citado 04 Octubre 2019]. Disponible en: https://www.radiologyinfo.org/sp/info.cfm?pg=cholecystitis

Mayo Clinic. Colecstitis. [Internet]. 2017 [Citado 04 Octubre 2019]. Disponible en: https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/cholecystitis/symptoms-causes/syc-20364867

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Les doy la más cordial bienvenida a mi blog, soy Alejandro Simba estudiante de la carrera de medicina en la Universidad Central del Ecuador.

Por este medio podrán informarse sobre temas relacionados con biología molecular. Espero que toda esta información les sirva de mucho y conozcan un poco mas sobre esto.

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